組換えDNMT1を用いたヒドロキシメチルシトシンの一塩基解像度の検出方法の開発

日本学術振興会

科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究

大阪大学

田嶋 正二
木村 博信
末武 勲
伊藤 隆司

挑戦的萌芽研究

https://kaken.nii.ac.jp/file/KAKENHI-PROJECT-15K14478/15K14478seika.pdf

ゲノムのメチル化修飾は高等真核生物の発生・分化に重要な役割を担っており、その樹立と維持機構は比較的解明が進んでいるが、消去機構は長年謎であった。最近、メチルシトシンが酸素添加酵素TETにより酸化されたヒドロキシルメチルシトシンが脱メチル化の中間体であることが報告された。一塩基レベルの解像度でゲノム内のヒドロキシメチルシトシンの存在位置を解析する技術は重要であるが、既報にはまだ難点がある。本研究では、DNAメチル基転移酵素DNMT1を利用して一塩基レベルでヒドロキシメチルシトシンを解析する新規な方法を開発した。